一、拿樣/取樣

拿樣：已有人取好樣品，放在一個固定的地方，檢測員每天上班后，拿好一個干凈的密閉容器，去把樣品拿回實驗室，期間注意樣品被污染。

取樣：也叫抽樣，需要自己去取/抽，去成品庫取成品，去車間現(xiàn)場取半成品、接觸面、非接觸面、水、冰、內(nèi)包袋、空氣、輔料等。無菌取樣，熟悉取樣方法、流程，帶好取樣工器具，做好樣品標識。取完樣，放在干凈密閉的容器，帶回實驗室，做好樣品登記。

二、無菌室滅菌

一般采用紫外燈滅菌。實驗室前、后打開紫外燈照射30分鐘。注意實驗前關(guān)燈后30min方可進入室內(nèi)工作。很多人分不清無菌室和超凈工作臺的使用和區(qū)別，本人理解：無菌室是用來做樣品前增菌的，超凈工作臺是用來做致病菌分離和特征/可疑菌落的進一步驗證的。

三、配制培養(yǎng)基和相關(guān)試劑

現(xiàn)在用的干粉培養(yǎng)基較多，按照檢測方法需要的培養(yǎng)基，買回來就行；用過的廠家有：北京陸橋、青島海博和廣州環(huán)凱。按照樣品數(shù)量配制相應(yīng)的培養(yǎng)基，也可以多配點，放著冷藏保存，有效期7天。干粉培養(yǎng)基保質(zhì)期一般是3年，開封后1年，一年一瓶都用不了的，稀少。配制培養(yǎng)基的水，一般選擇單蒸水。

培養(yǎng)基一般選擇濕熱滅菌法，稱量好干粉培養(yǎng)基，加入相應(yīng)的單蒸水，攪拌溶解后分裝，塞上瓶塞或試管塞，用報紙或牛皮紙包扎好，橡皮筋捆好，放入高壓滅菌鍋。現(xiàn)在有些實驗室是手提式滅菌鍋，需要手動排氣，人工計時，看壓力表，比較累。   

培養(yǎng)皿和吸管：一般選擇干熱滅菌，可我工作過的幾個實驗室，干燥箱基本是用來干燥的（使用溫度高容易壞，滅菌時間太久不想等待），也可以不用外校。培養(yǎng)皿和吸管包扎好后，放入高壓滅菌鍋滅菌。

培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、吸管等，滅好菌后，需冷卻；然后通過傳遞窗搬進無菌室。

四、無菌室增菌

采樣注意部位和代表性，一般采取可食部位。致病菌采樣部位視具體樣品而定。注意交叉污染。現(xiàn)在一般采用拍打式均質(zhì)器。

五、做好標識

每個實驗室標識最好是統(tǒng)一的做法，這樣大家都能認識，把增菌好的試管和瓶子，通過傳遞窗拿到培養(yǎng)室放進相應(yīng)的培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

六、整理無菌室

做完實驗，需要把無菌室整理好，工器具擺好位置，臺面做好清潔衛(wèi)生。打開紫外燈滅菌30分鐘。

七、影響微生物檢測結(jié)果的因素

1、 人 上崗培訓(xùn)，熟悉檢測方法；

2、 機 儀器設(shè)備正常運行，定時維護保養(yǎng)；

3、 料 材料正確，有效；

4、 法 檢測方法適合樣品檢測要求；

5、 環(huán) 環(huán)境滿足微生物檢測要求。

八、微生物檢測的幾點看法

1、資質(zhì)證書：今年取消的食品檢驗工資格考試，而且每個省份，每個行業(yè)要求不一樣，最好是邊工作邊考證。進入工作崗位，工作能力比證書重要。

2、熟悉檢驗方法，下載現(xiàn)行有效的版本，食品伙伴網(wǎng)提供免費下載。

3、25g稱樣量的波動范圍，GB4789標準中沒有明確，美國《微生物實驗室指南》中提到：a.溫度的波動范圍是±1℃；b.重量和容量的波動范圍是±1%；在該指南的第4.09章沙門氏菌檢驗中又指出：除特別規(guī)定，方法中所有指標的波動范圍是±2%。據(jù)此推理，25g稱樣量的波動范圍在±0.5g以內(nèi)是合適的。

4、儀器計量  

溫度、重量，壓力等影響實驗結(jié)果的儀器需要外校，同時實驗室需要內(nèi)校，溫度用水銀溫度計內(nèi)校，重量用標準砝碼內(nèi)校。一般外校的有效期是1年，高壓滅菌鍋的壓力表是半年。

5、參加培訓(xùn)，多學(xué)習(xí)肯定是好的。

6、有條件的，每年至少參加一次外部能力驗證，檢驗一下實驗室的檢測結(jié)果準確度，同時提升實驗室的可信度，外部審核或客戶驗廠，都會問能力驗證這塊。如果有并且獲得滿意結(jié)果，回答時的底氣都足些。