微生物的實(shí)驗(yàn)可以分為兩大部分:前期準(zhǔn)備和樣品檢驗(yàn)。
事實(shí)上,保持整個實(shí)驗(yàn)室清潔是非常重要的,這樣就不用在滅菌前擔(dān)心太多了,然而滅菌后必須保證樣品或者培養(yǎng)基免受污染。其實(shí),可以把滅菌想像成”一扇門”,在培養(yǎng)基中或者一些設(shè)備比如吸管的微生物都在滅菌過程中被殺死了,沒有微生物困擾實(shí)驗(yàn)了。必須保證滅菌后的環(huán)境(門后的部分)的潔凈,杜絕滅菌后的培養(yǎng)基和設(shè)備受到污染。
一、無菌的重要性
1、無菌技術(shù)——高壓濕熱滅菌
2、無菌技術(shù)——過濾 (Filtration)
3、無菌過程注意點(diǎn)
4、實(shí)驗(yàn)的無菌技術(shù)注意點(diǎn)
二、從微生物的實(shí)驗(yàn)室布局角度
一個設(shè)計合理的實(shí)驗(yàn)室能提供一個合格的環(huán)境以支持實(shí)驗(yàn)?zāi)軌虬踩行У剡M(jìn)行。首先,需要為實(shí)驗(yàn)室選擇一個合適的物理位置:
遠(yuǎn)離其他操作區(qū)域,比如,生產(chǎn)或者儲運(yùn);
沒有從其他區(qū)域進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的直接入口;
實(shí)驗(yàn)室必須是微生物實(shí)驗(yàn)專用;
應(yīng)有專門微生物檢測無菌間,并通過緩沖間與準(zhǔn)備間等進(jìn)行區(qū)隔。
三、遵照GLP相關(guān)的安全規(guī)則
1.GLP要點(diǎn)——工作區(qū)域
2、GLP要點(diǎn)——潔凈工作臺
四、一個有效的實(shí)驗(yàn)室
五、微生物防護(hù)用具
1、一級防護(hù)(設(shè)備)
①移液輔助器,如移液器
②生物安全柜
③一次性塑料接種環(huán)、電熱接種環(huán)
④螺口蓋試管及瓶子
⑤高壓滅菌器
⑥一次性塑料移液管
2、二級防護(hù)(人員)
①工作服、防護(hù)服
②手套(乳膠手套等)
③安全眼鏡、面罩或其他防護(hù)用品
六、檢測中常見問題解答
細(xì)菌和霉菌培養(yǎng)箱必須分開放置嗎?
在CNAS-CL09:2013《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明 》有此規(guī)定:5.3.3 e)檢測樣品中的霉菌時,要有適當(dāng)?shù)拇胧┛刂奇咦釉诳諝庵械臄U(kuò)散。但未見到明確規(guī)定細(xì)菌培養(yǎng)箱和霉菌培養(yǎng)箱不能在同一房間的規(guī)定。一般實(shí)驗(yàn)室都有三種培養(yǎng)箱,結(jié)構(gòu)設(shè)計上分為兩種,一種是內(nèi)部循環(huán)風(fēng)溫度平衡的,第二種是內(nèi)外熱空氣流動自動平衡型的,另外第三種是熱輻射溫度平衡型的。有網(wǎng)友認(rèn)為,第一種和第三種應(yīng)該可以放在一個實(shí)驗(yàn)室,保持一定距離即可。第二種培養(yǎng)箱應(yīng)該不能放在一個實(shí)驗(yàn)室。據(jù)說,CNAS現(xiàn)場評審,會提出細(xì)菌和霉菌培養(yǎng)箱分開放置要求。