1、平板上有過(guò)多的水分；

2、在劃線時(shí)沒(méi)有反復(fù)灼燒接種環(huán)；

3、多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線，越是稀釋到4區(qū)，間距要越寬。

1、嚴(yán)格控制滅菌溫度，需要按照要求進(jìn)行滅菌操作。如果培養(yǎng)基的含糖量較高，那么滅菌溫度就不能太高，否則就會(huì)使糖分焦化，從而影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。

2、不能反復(fù)融化瓊脂培養(yǎng)基，這會(huì)對(duì)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞。

3、不能對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行反復(fù)滅菌，這同樣也會(huì)對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞作用。 

4、在對(duì)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后需要將其充分搖勻。

5、需要將培養(yǎng)基完全溶解才能分裝培養(yǎng)基。

1、平板：大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

2、干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結(jié)塊后不能使用。

3、亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時(shí)，要常溫解凍，不能使用水浴加熱。

4、抗生素類(lèi)：冷藏保存，溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致靈敏度的下降。

5、兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會(huì)影響結(jié)果。

按SN、GB等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說(shuō)明所述時(shí)間進(jìn)行觀察，時(shí)間過(guò)短或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，單菌落的特征都不會(huì)很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基，時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán)，時(shí)間長(zhǎng)綿羊李氏菌也會(huì)產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，李氏菌使整個(gè)平板成黑色，不利于觀察單個(gè)菌落。霉菌要3天后要及時(shí)觀察計(jì)數(shù)，防止時(shí)間長(zhǎng)成一片。

1、溫度的掌握:卵黃和抗生素類(lèi)添加的溫度都不應(yīng)太高。

2、定量: 過(guò)多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌，太少又導(dǎo)致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。

1、真菌類(lèi)：25-28℃培養(yǎng)

2、細(xì)菌類(lèi)：李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。

3、其他一般在36℃左右

穿刺接種、傾注接種、涂布接種、劃線接種。