一、有機(jī)質(zhì)破壞法

應(yīng)用于檢測(cè)食品中的微量金屬，也可用于檢測(cè)食品中的非金屬元素，如氯、磷等。常用的有干法灰化、濕法消化、微波消解三大類。

原則是：方法簡(jiǎn)便，使用試劑越少越好；耗時(shí)短，有機(jī)物破壞的越徹底越好；被測(cè)元素不受損失；破壞后溶液容易處理，不影響以后的測(cè)定步驟。

常見灼燒裝置是灰化爐，即高溫馬弗爐。

樣品放入坩堝，小心炭化，500~600℃灼燒灰化后，水分及揮發(fā)物質(zhì)以氣態(tài)逸出，樣品中的碳、氫、氮與本身的氧及空氣中的氧氣生成CO₂、H₂O和氮的氧化物散失，最后留下無機(jī)物（無機(jī)灰分）。

優(yōu)點(diǎn)是有機(jī)物被破壞徹底，操作簡(jiǎn)單，使用試劑少，適用于大批量樣品的分析測(cè)定。缺點(diǎn)是砷、汞、鉛等金屬容易在高溫下?lián)]發(fā)損失。

對(duì)于難以灰化的樣品，為了縮短灰化時(shí)間，促進(jìn)灰化完全，可用灰化助劑。

灰化助劑有兩類：

①乙醇、硝酸、碳酸銨、過氧化氫，灼燒后完全消失，不增加殘灰質(zhì)量，可加速灰化。

②氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽，與灰分混雜，使碳粒不被覆蓋，所以燃燒完全，應(yīng)同時(shí)做空白試驗(yàn)。

在強(qiáng)酸、強(qiáng)氧化劑并加熱的條件下，有機(jī)質(zhì)被分解，其中碳、氫、氮以CO2、H2O和氮的氧化物等形式揮發(fā)逸出，無機(jī)鹽和金屬離子則留在溶液中。

平板電爐為消解裝置，整個(gè)過程都在液體狀態(tài)下加熱進(jìn)行，置于通風(fēng)處。

所用的強(qiáng)氧化劑有：濃硫酸、濃硝酸、高氯酸、雙氧水等，實(shí)際工作中一般使用混合氧化劑。優(yōu)點(diǎn)是加熱溫度較干法低，減少了金屬揮發(fā)逸散的損失。缺點(diǎn)是會(huì)產(chǎn)生大量有毒氣體，操作需在通風(fēng)柜中進(jìn)行。耗用試劑較多。

消化初期，產(chǎn)生大量泡沫，易沖出瓶頸，造成損失，需操作人員隨時(shí)照管，操作中還應(yīng)控制火力，注意防爆。必須做空白試驗(yàn)。

將樣品置于密封的聚四氟乙烯消解管中，微波加熱，完成有機(jī)質(zhì)分解的工作。

優(yōu)點(diǎn)是樣品全部消解不會(huì)造成元素?fù)p失，試劑少，耗時(shí)短，缺點(diǎn)是價(jià)格高，容量偏小，不宜處理高揮發(fā)性的物質(zhì)（容易發(fā)生爆炸），必要時(shí)需進(jìn)行加熱預(yù)消解。

二、蒸餾法

定義：利用液體混合物中各組分揮發(fā)性的不同，分離出純組分的方法。

用于除去干擾組分，也可用于蒸餾分離出被測(cè)組分。常用蒸餾法有：常壓蒸餾、減壓蒸餾、水蒸氣蒸餾。

常壓蒸餾用于受熱后不發(fā)生分解或沸點(diǎn)不太高的樣品。如二氧化硫。沸點(diǎn)不高于90℃可用水浴，如果沸點(diǎn)超過90℃，可改用油浴、沙浴、鹽浴。蒸餾器要加石棉或棉墊保溫。如被蒸餾物不易爆炸或燃燒，可用酒精燈或電爐直接加熱。

減壓蒸餾用于常壓下容易分解或沸點(diǎn)太高，或被蒸餾組分與水分形成共沸物不易蒸餾完全的樣品。

水蒸氣蒸餾適用于檢測(cè)食品樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)或低沸點(diǎn)物質(zhì)。如糕點(diǎn)中的丙酸和N-亞硝胺類。

三、溶劑提取法

利用樣品或試液中各組分對(duì)某種溶劑溶解度不同，加入某些溶劑，將欲分離組分完全或部分分離的方法。根據(jù)兩相狀態(tài)不同可分固-液萃取法、液-液萃取法。

用適當(dāng)?shù)娜軇�將固體樣品中的某組分萃取出來，又稱浸提法。

溶劑既要對(duì)被提取組分有很好的溶解度，又不與樣品發(fā)生作用，同時(shí)沸點(diǎn)不應(yīng)太高，否則不利于溶劑回收。常用的固-液萃取模式有：振蕩萃取、勻漿萃取、索氏萃取器萃取、超聲波萃取等。

（1）振蕩萃取

均勻樣品可直接加入溶劑，浸泡后在振蕩器上振蕩。非均勻樣品可先加入適量蒸餾水勻漿后，再加入溶劑浸泡、振蕩30～60min。振蕩后過濾，殘?jiān)�用溶劑洗滌，合并入萃取液。可用于提取六六六、滴滴涕�?/span>

（2）勻漿萃取

準(zhǔn)確稱取適量樣品，加入一定體積溶劑，高速勻漿機(jī)快速搗碎制成勻漿，過濾。為萃取充分，濾渣可加溶劑重復(fù)萃取，合并萃取液。如乙腈作為溶劑勻漿萃取果蔬中的農(nóng)藥組分。

（3）索氏萃取器

通過連續(xù)循環(huán)回流萃取，效率高，但時(shí)間較長(zhǎng)。如脂肪測(cè)定。

（4）超聲波萃取

細(xì)微狀態(tài)樣品置于容器中，加入溶劑，將容器浸于超聲波儀中，以超聲波加速分析物的溶解和擴(kuò)散，提高萃取效率。用于快速提取樣品中的待測(cè)目標(biāo)化合物。

利用分析物與干擾物在兩種不相容的溶劑中分配系數(shù)不同，使分析物從干擾物中分離，從而達(dá)到樣品液的凈化。通常將分析物分離到有機(jī)相，通過有機(jī)溶劑蒸發(fā)來濃縮分析物。

（1）溶劑的選擇

與水互溶的有機(jī)溶劑，不適用液液萃取。如低分子量的醇、酮、醛、乙腈。采用單一純?nèi)軇┨崛《嘟M分殘留物的效果經(jīng)常不理想，通常用非極性溶劑和極性溶劑組成一對(duì)溶劑來進(jìn)行分配。

常用溶劑對(duì)有丙酮-乙烷（石油醚）、環(huán)己烷-乙酸乙酯。

選擇溶劑應(yīng)符合“相似相溶”原則，溶劑的極性越接近分析物的極性，萃取效率越高。

常用溶劑的極性大小順序?yàn)椋?/span>

水>乙腈>甲醇>乙酸乙醇>異丙醇>丙酮>四氫呋喃>乙酸乙酯>三氯甲烷>硝基甲烷>二氯甲烷>乙醚>苯>甲苯>四氯化碳>二硫化碳>環(huán)己烷>正己烷

（2）pH的影響

影響有效萃取的最重要因素之一。

脫氫乙酸、苯甲酸、山梨酸等在酸性條件下會(huì)溶解在某些有機(jī)溶劑中，將樣品-溶劑體系pH值調(diào)至堿性，化合物就會(huì)生成鹽類分配到水相中。

萃取出的堿性分析物可反萃取到酸性有機(jī)溶液中。如氣象色譜法測(cè)定脫氫乙酸、過氧化苯甲酰等。

（3）避免和破壞乳化的常用方法

急速振動(dòng)樣品使其在分液漏斗中發(fā)生完全的混合，是一個(gè)非常重要的操作。

產(chǎn)生大量的界面區(qū)域，利于有效分配。由于物質(zhì)劇烈振動(dòng)，液液萃取中常發(fā)生乳化現(xiàn)象，尤其是含有表面活性劑和脂肪的樣品，會(huì)影響被測(cè)組分?jǐn)?shù)據(jù)的準(zhǔn)確。

避免和破壞乳化的方法有：混合震搖時(shí)，輕緩的固定一個(gè)方向震搖；采用高速離心振蕩或振蕩后再用玻璃棉或?yàn)V紙過濾；加鹽到水相，通常有NaCl固體、2%~5%NaCl溶液或Na2SO4溶液。加入少量另一種有機(jī)溶劑，如無水乙醇。

四、樣品的濃縮

目的：從樣品中萃取的分析物濃度如果在定量限之上，那么在色譜分析時(shí)將沒有干擾，可直接進(jìn)行測(cè)定。

但當(dāng)被測(cè)化合物的濃度較低時(shí)，需要在凈化和測(cè)定前將萃取液濃縮。樣品液的濃縮過程就是溶劑揮發(fā)的過程。將溶劑蒸發(fā)至近干即可，否則由于溶劑蒸干會(huì)導(dǎo)致分析物損失。常用濃縮方法：

適用于小體積樣品液和易揮發(fā)溶劑，可適當(dāng)加熱。

優(yōu)點(diǎn)是溫度低，濃縮速度快。但旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)過程中，水浴溫度不宜過高，真空度不宜過低，否則溶劑蒸發(fā)過快易帶走目標(biāo)化合物。

五、氣相色譜化學(xué)衍生化

利用化學(xué)反應(yīng)使樣品中目標(biāo)分析物與衍生化試劑作用生成衍生物（改變樣品化學(xué)性質(zhì)），使其適合于特定的分析方法。

在氣相色譜分析中，制備衍生物的目的是：

①解決原化合物不能直接進(jìn)樣分析的問題：某些物質(zhì)揮發(fā)性過高或過低，難以汽化，或者極性太強(qiáng)或穩(wěn)定性差，不能直接進(jìn)樣分析。如：脂肪酸沸點(diǎn)高，難汽化，經(jīng)甲酯化生成脂肪酸甲酯衍生物，易于氣相色譜分析。

②通過制備衍生物對(duì)分析物進(jìn)行分離和鑒定：如：環(huán)己基氨基磺酸鈉在酸性條件下與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成特定的化合物，從而可用氣相色譜法氫火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行定性定量測(cè)定。

③化合物通過特有試劑衍生化后進(jìn)行檢測(cè)：化合物經(jīng)特有試劑衍生后，可用選擇性檢測(cè)器進(jìn)行分析，提高靈敏度及最低檢測(cè)量。如：奶粉中的碘，在適當(dāng)條件下，用丁酮衍生后，生成的碘丁酮可以用氣相色譜電子捕獲檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定。

反應(yīng)容易重復(fù)，操作簡(jiǎn)單；反應(yīng)能定量進(jìn)行；衍生物易純化；衍生物易于色譜分離和檢測(cè)；沒有或少有副反應(yīng)，反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)率高；衍生物的沸點(diǎn)與原化合物的沸點(diǎn)相比至少差10℃。

（1）硅烷化反應(yīng)

三甲基硅烷化應(yīng)用較多。含有羥基、羧基、巰基、氨基等官能團(tuán)的化合物與硅烷化試劑反應(yīng)后，官能團(tuán)上的氫原子被烷基-硅基取代，生成極性低、揮發(fā)性高、熱穩(wěn)定性好的硅烷基化合物。

硅烷化反應(yīng)體系中不能含有水分，否則會(huì)導(dǎo)致衍生失敗。選用溶劑一般為己烷、苯、吡啶、四氫呋喃、二甲基亞砜等非極性溶劑。

制備衍生物時(shí)，將樣品提取液揮發(fā)至干，加入硅烷化衍生試劑50~100μL，混勻后在60~80℃下加熱20~60min。

（2）�；�反應(yīng)

官能團(tuán)中活潑氫被�；�取代，生成極性低、揮發(fā)性高的衍生物。�；�反應(yīng)可分為酸酐法和鹵代�；�法。制備衍生物時(shí)，將樣品提取液揮發(fā)至干，加入�；�衍生試劑100μL，再加50μL吡啶，混勻后在60~80℃下加熱20~30min。

（3）酯化反應(yīng)

特別適用于含羥基的脂肪酸、氨基酸、羧基酸、不飽和酸、多元酸、芳香酸、多環(huán)酸、無機(jī)酸等化合物的衍生化。
通常有甲酯化、丁酯化、芐酯化。

制備衍生物時(shí)，將樣品提取液揮發(fā)至干，加入酯化衍生試劑100μL，混勻后在60℃加熱20~30min。